高压灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的高压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在使用灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全ji为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。所以饱和蒸汽的灭菌更彻底！

高压灭菌锅属于一种专用的灭菌设备，被用于各种工业、医疗等方面，对其操作必须严格的按照使用说明，避免在使用过程中因使用不当造成灭菌失败甚至发生事故。

高压灭菌锅即直接利用火焰将微生物灼烧致死。特点：简便、迅速、彻底。主要用于接种工具及器皿的灭菌。如接种杯、镊子、剪刀、玻棒、瓶口及其封口用的铝箔的灭菌常见的错误有：

（1）接种工具的灭菌范围不够，如长度不够，灼烧时没有旋转造成内外侧灭菌不匀；

（2）接种工具没有降至常温即用于接种；

（3）对玻璃器皿灼烧过度，使棉塞、封口膜焦化或熔化。

高温灭菌锅的使用方法

1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。

2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。高压灭菌锅待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。

5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。

6．高压灭菌锅将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。不过有几点要注意的：①锅内必须要有充足的水。②锅的气密性一定要很好。③使用完后一定要放到适合温度才可以打开。