高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的du蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

       注意:完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。常见的方式是：关闭闸阀，开关电源后，当工作压力上升到0.05mpa时，开启气体闸阀，释放出来气体，当气压表偏向零时，再关闭闸阀。关阀再通电后，压力表上升达到0.1MPa时,开始计时，维持压力0.1～0.15MPa20分钟。

       到达保压时间后，即可切断电源，在压力降到0.5MPa，可缓慢放出蒸气，应注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。当工作压力降至零时，能够开启外盖，清除物质，放到服务平台上，等候冷疑。在短期内内，原材料的构成产生变化，使化合物不可以歪斜。一旦放置过久，由于锅炉内有负压，盖子打不开，只要将放气阀打开，大气压入，内外压力平衡，盖子便易打开了。

       对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而物质应严格执行保压時间，不但要完全保压，并且要避免物质的构成恶变或减少实效性，不可以随意延长性时间。操作步骤1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要太拥挤，以免蒸汽流通和影响灭菌。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。3.盖上并将自然通风塑料软管插进杀菌桶的排气箱。另外以二种对称性方法扭紧相对性2个螺栓，使螺栓松脱一致，不渗水。4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。当强冷空气彻底排出来时，关掉自动放气阀，随蒸气压力更改锅内温度。当锅内的压力升至需要的压力时，操纵热源并将压力保持到需要的時间。试验选用1.05kg/cm2、121.3c、20min杀菌。5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。6.在37℃熔融二十四小时后，可应用无菌检测培养液。